Page 30 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
ДЕТЕРМИНАЦИЈА ПОЛИМОРФИЗМА DRD2 ГЕНА (rs1800497) ПРИМЕНОМ REAL-TIME PCR МЕТОДЕ

Аутори: Игор Келечевић, Милица Кнежевић
e-mail: igorkel@hotmail.com
Ментор: асист. Катарина Бачулов, доц. др Наташа Вучинић
Катедра општеобразовних предмета, Медицински факултет Нови Сад, Универзитет у Новом Саду

Увод: Анализом специфичне секвенце нуклеотида у близини DRD2 гена откривен је полиморфизам (rs1800497) који утиче
на његову експресију. Овај полиморфизам је повезан са многим поремећајима за које се претпоставља да су последица
измењене експресије DRD2 гена. Због ове повезаности, постоји значајан интерес за ефикасном детекцијом присуства
полиморфизма у DRD2 гену.
Циљ рада: Оптимизација real-time PCR методе у генотипизацији полиморфизма DRD2 гена (rs 1800497).
Материјал и методе: Изоловани су узорци DNK из ћелија крви пет здравих индивидуа. Узорци DNK су амплификовани у
PCRреакцији коришћењем ''ABI Prism 7500 Fast'' real-time PCRапарата. Употребљени су TaqMan есеји за одређивање
полиморфизама једног нуклеотида. Продукти амплификације су анализирани употребом 7500 SDS Software програма.
Резултати:Након успешне PCR реакције, у нашим узорцима детектовано је присуство алела који се разликују у једном
нуклеотиду. Један од пет узорака био је хомозигот (A1A1), а три од пет хетерозиготи (A1A2) за мутирани алел. Један узорак
је био хомозигот за дивљи алел (A2A2).
Закључак:Real-time PCRметода, иако финансијски захтевнија, се препоручују за генотипизацију DRD2 гена у рутинској
дијагностици због своје једноставности, брзине извођења и успешности.
Кључне речи:DRD2 ген; real-time PCR; полиморфизам; генотипизација

DRD2 GENE POLYMORPHISM (rs1800497) DETERMINATION USING REAL-TIME PCR

Author: Igor Kelečević, Milica Knežević
e-mail: igorkel@hotmail.com
Mentor: TA Katarina Bačulov, Assist. Prof. Nataša Vučinić
Department of General Education Subjects, Faculty of MedicineNovi Sad, University of Novi Sad

Introduction: After analysing a specific nucleotide sequence located near DRD2 gene, a polymorphism (rs1800497), that affects its
expression, is detected. This polymorphism is associated with many disorders that are presumably related to modified expression
of this gene. Because of this association, a considerable interest in efficient detection of DRD2 allele is developed.
The Aim: Optimization of real-time PCR-based method for genotyping DRD2 gene polymorphism (rs1800497).
Material and Methods: DNA samples were isolated from blood cells of five healthy individuals. DNA samples were amplified in PCR
reaction using ''ABI Prism 7500 Fast'' real-time PCR device. The TaqMan assays that determine single-nucleotide polymorphisms
were used. The products of amplification were analyzed using 7500 SDS Software.
Results:After a successful PCR reaction, the two alleles, that differ in one nucleotide, were detected in our samples. One in five
samples was homozygous carrier of mutated allele (A1A1), and three in five samples were heterozygous (A1A2) carriers. One
sample was homozygous carrier of wild allele (A2A2).
Conclusion: Although it is financially more demanding, real-time PCR method is recommended for DRD2 genotyping in routine
diagnostics because it is simple, fast and efficient.
Keywords: DRD2 gene; real-time PCR; polymorphism; genotyping

Kopaonik, 2018.
24