Page 220 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
ИСПИТИВАЊЕ АНТИТУМОРСКОГ ДЕЈСТВА ЕКТРАКТА PHELLINUS LINTEUS-А НА ЋЕЛИЈСКИМ КУЛТУРАМА ХУМАНЕ
ЛЕУКЕМИЈЕ

Аутор: Сара Ковачевић
e-mail: sarakovacevic0007@gmail.com
Ментор: доц. др Милан Зарић
Институт за биохемију, Факултет медицинских наука Универзитета у Крагујевцу

Увод: Леукемије представљају хетерогену групу болести које имају различиту клиничку слику, прогнозу и степен
агресивности, али је за све типове леукемија карактеристична неконтролисана деоба леукемијских ћелија, која може бити
праћена инхибицијом апоптозе туморских ћелија. Phellinus linteus је гљива која се вековима користила у Кини, Јапану и
Кореји у третману различитих болести и стања повезаних са инфламацијом и туморима, али њено дејство на леукемијске
ћелије још увек није довољно испитано.
Циљ рада: Циљ овог истраживања је био да се испита антитуморско дејство метанолског екстракта гљиве Phellinus linteus
(PL) на ћелијским културама хумане леукемије MOLT-4 и JVM-13 и испитивање доминантног типа ћелијске смрти којим
долази до смањења вијабилности леукемијских ћелија.
Материјал и методе: Цитотоксичност PL-a је испитана 24 и 48 часова након третмана леукемијских ћелија MOLT-4 и JVM-13
и контролне популације мезенхималних матичних ћелија (MSCs) концентрацијама екстракта од 0,3 µg/ml до 100 µg/ml (0,3
µg/ml, 1 µg/ml, 3 µg/ml, 10 µg/ml, 30 µg/ml и 100 µg/ml) у односу на нетретиране ћелије, применом МТТ теста. Доминантан
тип ћелијске смрти којим je долазило до смањења вијабилности туморских ћелија je испитан методом проточне
цитометрије ћелија бојених Annexin-ом V и 7-аминоактиномицином D.
Резултати: PL je деловаo цитотоксично на леукемијске ћелије, а није деловао на малигно неизмењене MSCs. Концентрације
екстракта које су смањивале вијабилност третираних ћелија у односу на нетретиране ћелије за 50% (IC 50 вредности) су за
MOLT-4 ћелије износиле >100 и 24,3±4,5 µg/ml после 24 односно 48 часова, за JVM-13 ћелије су износиле 14,6±3,8 и 11,9±3,2
µg/ml после 24 односно 48 часова, а за MSCs су износиле >100 µg/ml и после 24 и после 48 часова инкубације. PL je
доминантно смањивао вијабилност MOLT-4 и JVM-13 ћелија индукцијом апоптозе.
Закључак: PL je деловао селективно цитотоксично на леукемијске ћелије индукцијом апоптозе, а није деловао на малигно
неизмењене ћелије у испитиваним концентрацијама.
Кључне речи: леукемија; Phellinus linteus; цитотоксичност; МТТ тест; апоптоза

ANTITUMOR EFFECTS OF PHELLINUS LINTEUS EXTRACT ON HUMAN LEUKEMIA CELLS

Author: Sara Kovačević
e-mail: sarakovacevic0007@gmail.com
Mentor: Assist. Prof Milan Zarić
Department of Biochemistry, Faculty od Medical Sciences University of Kragujevac

Introduction: Leukemias are a heterogeneous group of diseases that display various clinical picture and prognosis, but all leukemias
are characterized by uncontrolled cell division, which can be followed by inhibition of tumor cells’ apoptosis. Phellinus linteus has
been used for centuries in China, Japan and Korea to treat inflammations and tumors, but its effect on leukemia cells has not yet
been tested.
The Aim: The aim of our study was to investigate the antitumor effect of the Phellinus linteus methanol extract (PL) on MOLT-4 and
JVM-13 human leukemia cells, and to investigate the dominant type of cell death which leads to reduction of leukemia cells.
Material and Methods: The cytotoxicity of PL was tested 24 and 48 hours after the MOLT-4 and JVM-13 leukemia cells treatment
and the treatment of control population of mesenchymal stem cells (MSCs), with PL concentrations of 0.3 μg/ml to 100 μg/ml (0.3
μg/ml, 1 μg/ml, 3 μg/ml, 10 μg/ml, 30 μg/ml and 100 μg/ml) compared to untreated cells, using the MTT assay. The dominant type
of cell death was examined by flow cytometry of cells stained with Annexin-V and 7-amino-aminoactinomycin-D.
Results: PL exhibited cytotoxic effects to leukemia cells, but did not affect malignantly unchanged MSCs. The concentrations of PL
that reduced the viaibility of treated cells by 50% compared to untreated cells (IC 50 values) for MOLT-4 cells were >100 and
24.3±4.5 μg/ml after 24 and 48 hours, respectively, for JVM-13 cells were 14.6±3.8 and 11.9±3.2 μg/ml after 24 or 48 hours,
respectively, and for MSCs were >100 μg/ml both after 24 and 48 hours of incubation. PL dominantly reduced the viability of MOLT-
4 and JVM-13 cells by apoptosis.
Conclusion: PL was selectively cytotoxic to leukemia cells by induction of apoptosis, and did not affect the viability of malignantly
unchanged cells in the tested concentrations.
Keywords: leukemia; Phellinus linteus; cytotoxicity; MTT assay; apoptosis

Kopaonik, 2018.
214