Page 218 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
УЛОГА СТРЕСА ЕНДОПЛАЗМАТСКОГ РЕТИКУЛУМА У ЕКСПЕРИМЕНТАЛНОМ АУТОИМУНСКОМ ЕНЦЕФАЛОМИЈЕЛИТИСУ

Аутори: Нина Томоњић, Андона Миловановић
e-mail: nina.tomonjic93@gmail.com
Ментор: доц. др Жељка Станојевић
Институт за медицинску и клиничку биохемију, Медицински факултет Универзитета у Београду

Увод: Стрес ендоплазматског ретикулума (ЕР стрес), проузрокован нагомилавањем протеина спакованих у неодговарајућем
облику унутар ендоплазматског ретикулума (ЕР), препознат је као молекуларни механизам који има удела у патогенези
многих неуродегенеративних болести, међу којима је и мултипла склероза (МС). Драгоцен допринос испитивању још увек
недовољно разјашњене улоге ЕР стреса у имунопатогенези МС-а, даје њен широко употребљаван анимални модел,
експериментални аутоимунски енцефаломијелитис (ЕАЕ).
Циљ рада: Циљ овог рада је да испита да ли ЕР стрес има улогу у патогенези ЕАЕ-а.
Материјал и методе: ЕАЕ је индукован пацовима Dark Agouti (DA) и Albino Oxford (AO) соја хомогенатом кичмене мождине
+
DA/AO пацова (ХКМ) са Комплетним Фројндовим адјувансом (CFA). Изоловани су периферни лимфни чворови, CD3 ћелије
издвојене проточном цитометријом од осталих ћелија лимфних чворова. Такође су изоловане мононуклеарне ћелије
кичмене мождине (МНЋКМ) и сви добијени узорци анализирани на присуство Grp78 и Gadd153 протеина (маркера ЕР
стреса) методом имуноблота. Праћена је и промена нивоа ових протеина у зависности од развоја болести, а добијени
подаци упоређивани са контролним (из узорака неимунизованих животиња).
Резултати: Код имунизованих пацова DA соја уочава се статистички значајан пораст нивоа Grp78 (p<0,05) и Gadd153
протеина (p<0,01) у периферним лимфним чворовима који је у складу са развојем болести, у односу на контролу. Насупрот
томе, код имунизованих пацова AO соја који су резистентни на индукцију ЕАЕ-а, не постоји статистички значајна разлика у
нивоу поменутих протеина у односу на неимунизоване животиње (p>0,05). Такође, статистички значајна разлика се не
+
уочава у нивоу маркера ЕР стреса у CD3 ћелијама лимфних чворова имунизованих DA пацова у ондосу на контролу. У
МНЋКМ имунизованих DA пацова који су жртвовани у различитим стадијумима болести, уочава се прогресиван пораст
нивоа Grp78 и Gadd153 протеина који је у корелацији са тежином клиничке слике.
Закључак: Приказани резултати доказују улогу ЕР стреса у патогенези ЕАЕ-а.
Кључне речи: ЕР стрес; МС; ЕАЕ; Grp78; Gadd153

ENDOPLASMIC RETICULUM STRESS IN EXPERIMENTAL AUTOIMMUNE ENCEPHALOMYELITIS

Authors: Nina Tomonjić, Andona Milovanović
e-mail: nina.tomonjic93@gmail.com
Mentor: Assist. Prof. Željka Stanojević
Institute of Medical and Clinical Biochemistry, Faculty od Medicine University of Belgrade

Introduction: Endoplasmic reticulum stress (ER stress), caused by the accumulation of unfolded or misfolded proteins in the
endoplasmic reticulum (ER), is an important feature of various neurodegenarative diseases, such as multiple sclerosis (MS). The role
of ER stress in immunopathogenesis of MS can be analysed using its most used animal model, experimental autoimmune
encephalomyelitis (EAE).
The Aim: The aim of this study was to examine the potential role that ER stress might have in pathogenesis of EAE.
Material and Methods: EAE was induced to rats of Dark Agouti and Albino Oxford strains with spinal cord homogenate from DA/AO
+
rat (SCH) with Complete Freund’s adjuvant (CFA). Peripheral lymph nodes (PLN) were extracted, CD3 cells sorted by flow
cytometry from the lymph node cells, and isolated spinal cord mononuclear cells (SCMNC) were analysed for the presence of Grp78
and Gadd153 proteins (ER stress markers) using immunoblotting, and obtained data was compared to the controls (samples from
healthy animals). Also, the correlation between changes in protein levels and the course of EAE was carried out.
Results: In EAE induced DA rats, statisticaly significant increase in Grp78 (p<0.05) and Gadd153 (p<0.01) protein levels was
observed in PLN compared to controls, and that increase was in correlation with the course of disease. On the contrary, AO rats are
resistant to the induction of EAE and no significant change in ER stress markers in PLN was present, compared to controls (p>0.05).
+
Likewise, there was no difference between Grp78 and Gadd153 protein levels among CD3 lymph node cells in EAE DA rats,
compared to healthy controls (p>0.05). In SCMNC, Grp78 and Gadd153 protein levels were increasing consistent with worsening of
the disease.
Conclusion: Results demonstrate that ER stress has an influence on EAE pathogenesis.
Keywords: ER stress; MS; EAE; Grp78; Gadd153

Kopaonik, 2018.
212