Page 204 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
УСПОСТАВЉАЊЕ ЋЕЛИЈСКОГ МОДЕЛА ИНСУЛИНСКЕ РЕЗИСТЕНЦИЈЕ НА ЋЕЛИЈАМА ХЕПАТОМА ТРЕТМАНОМ
ПАЛМИТИНСКОМ КИСЕЛИНОМ

Аутор: Лидија Микић
e-mail: lidijamikic5@icloud.com
Ментор: проф. др Иванка Марковић
Институт за медицинску и клиничку биохемију, Медицински факултет Универзитета у Београду

Увод: Инсулинска резистенција, која се дефинише као смањена способност ћелија да одговоре на деловање инсулина, има
кључну улогу у патогенези више поремећаја као што су гојазност, дијабетес тип 2 и метаболички синдром. Повишен ниво
слободних масних киселина (СМК) у плазми, који је чест пратилац гојазности, може имати значајну улогу у настанку
инсулинске резистенције.
Циљ рада: Успостављање модела инсулинске резистенције на хуманим ћелијама хепатома HuH7, третманом палмитинском
киселином.
Материјал и методе: За тестове ћелијских вијабилитета рађени су МТТ и кристал виолет тест, који су примењивани након
24 сата инкубације ћелија у присуству палмитата. За анализу експресије и нивоа активације протеина рађена је техника
имуноблота у којој су протеини инкубирани са антителима за pAkt, tAkt и актин.
Резултати: Након 24сата третмана палмитатом, није дошло до значајне промене у вијабилитету ћелија, али је МТТ тест
показао да је дошло до промене у активности митохондрија и то дозно зависно, односно са порастом дозе, (почевши од
0,03 мМ) активност митохондрија је опадала. Претретман палмитатом је довео и до смањења активације протеин киназе Б
(односа pAkt-а у односу на tAkt) у одговору на краткотрајни третман инсулином.
Закључак: Третман палмитинском киселином индукује смањење одговора на инсулин, јер доводи до смањења активности
сигналног пута инсулина, што се може сматрати ћелијским еквивалентом инсулинске резистенције, и корисно је у бољем
разумевању болести које су повезане са њом, пре свега диабетеса мелитуса типа 2.
Кључне речи: инсулинска резистенција;палмитат; дијабетес мелитус; Akt

ESTABLISHMENT OF PALMITATE-INDUCED INSULIN RESISTANCEINVITRO MODELON HEPATOMA CELL LINE HUH7

Author: Lidija Mikic
e-mail: lidijamikic5@icloud.com
Mentor: Full Prof. Ivanka Markovic
Insitute of Medical and Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine University of Belgrade

Introduction: Insulin resistance, defined as a diminished cellular capacity to respond to the action of insulin, plays a central role in
the development of several disorders, such as obesity, type 2 diabetes, and the metabolic syndrome. Elevated plasma free fatty
acid (FFA) levels, which often accompanies obesity, may play a pathogenic role in the development of insulin resistance.
The Aim: Establishment of palmitate-induced insulin resistance model on human hepatoma cell line HuH7.
Material and methods: Cell viability was determined by Crystal Violet and MTT assay following 24-hour palmitate treatment,
Western blot was used for protein expression and activation analysis, with antibodies for pAkt, tAkt and actin.
Results: After 24-hour palmitate treatment, no significant change in cell viability was observed, but the MTT assay showed that
palmitate induced concentration-dependent decrease in mitochondrial activity (concentrations > 0,03 mM) . Palmitate
pretreatment (24h) caused decreased Akt acitvation after acute insulin exposure compared to control cells that were not exposed
to palmitate.
Conclusion: Palmitate treatment caused decreased receptor response to insulin, which is cellular equivalent of insulin resistance,
the fact that could be used for better understanding of the deseases that are relatedto it, esspecialy diabetes mellitus type 2.
Keywords: insulin resistance; palmitate; diabetes mellitus; Akt

Kopaonik, 2018.
198