Page 199 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ 26-30.
СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ Април

УТИЦАЈ НОВОСИНТЕТИСАНОГ ПОЛИОКСОПАЛАДАТА НА ХУМАНОЈ ЋЕЛИЈСКОЈ ЛИНИЈИ НЕУРОБЛАСТОМА, IN VITRO

Аутор: Јован Исма
e-mail: isma.jovan@gmail.com
Ментор: асист. др Анђелка Исаковић
Институт за медицинску и клиничку биохемију, Медицински факултет Универзитета у Београду

Увод: Полиоксометалати (ПОМ) су неорганска група једињења, која садрже прелазне метале и оксидни анјон као основу.
Хетерополиоксометалати су атрактивни због бројних биолошких ефеката, са акцентом на антитуморско дејство. Механизми
деловања ових једињења нису довољно разјашњени, што све више усмерава научна истраживања ка разумевању њиховог
деловања.
Циљ рада: Испитивање цитотоксичног ефекта новосинтетисаног ПОМ који садржи паладијум, названог Pd3, на ћелијама
хуманог неуробластома SH-SY5Y.
Материјал и методе: Вијабилитет SH-SY5Y ћелија након третмана испитиван је методом киселе фосфатазе и лактат
дехидрогеназе. Проточна цитометрија је коришћена за утврђивање механизма ћелијске смрти коришћењем одговарајућих
флуорохрома, ApoStat за доказивање активације каспаза, пропидијум јодид (ПИ) за испитивање ћелијског циклуса и
фрагментације генетичког материјала, двоструко бојењеа нексином и ПИ за утврђивање апоптозе и некрозе, а
акридиноранж за доказивање присуства киселих везикула у третираним ћелијама.
Резултати: Pd3 комплекс показује временски и дозно-зависан цитотоксични ефекат. Каспазна активност није уочена у
третману од 24 ч и 48 ч. Испитивани комплекс није довео до промене процента ћелија у различитим фазама ћелијског
циклуса нити до фрагментације генетичког материјала након третмана у трајањуод 24 ч и 48 ч. Статистички значајан пораста
нексин негативних, пропидијумјодид позитивних SH-SY5Y ћелија који сугеришу некрозу је детектован након 48 чтретмана.
Повећање активности лактат дехидрогеназе у супернатанту ћелијске културе указује на нарушавање интегритета ћелијских
мембрана након третмана. Pd3 је индуковао пораст броја киселих везикула у третираним ћелијама након 48 ч.
Закључак: Pd3 комплекс доводи до цитотоксичних ефеката који су временски и дозно зависни. Цитотоксични ефекти Pd3
комплекса су вероватно последица некрозе уз активацију аутофагије чија улога у овим ефектима није разјашњена.
Кључне речи: полиоксометалати; цитотоксичност; некроза; аутофагија

EFFECTS OF NEWLY SYNTHESIZED POLYOXOPALADATE ON HUMAN NEUROBLASTOMA CELL LINE, IN VITRO

Author: Jovan Isma
e-mail: isma.jovan@gmail.com
Mentor: TA Anđelka Isaković
Institute of Medical and Clinical Biochemistry, Faculty od Medicine University of Belgrade

Inroduction: Polyoxometalates are inorganic compounds with early transitional metal and oxide anione as a backbone.
Heteropolyoxometalates are atractive in cancer medicine, because they exert many biological effects on molecular level. Scientific
research is directed towards understanding mechanisms of actions of these compounds.
The Aim: Investigation of cytotoxic effects of novel synthesized and untested polyoxopaladate Pd3 on human neuroblastoma cell
line SH-SY5Y.
Material and Methods:Effects on viability rate of treated cells were tested using acid phosphatase and lactate dehydrogenase
assays. The mechanism of cell death was examined using flow cytometry. ApoStat, propidium iodide, acridin orange staining and
annexin-propidium iodide double staining were conducted in order to elucidate caspase activation, DNA fragmentation, cell
necrosis and apoptosis, and presence of intracellular acidic vesicles.
Results: Pd3 has shown dose and time dependent decrease in viability rate of SH-SY5Y cells. Complex didn't induce caspase
activation after 24-h and 48-h treatment. No difference in the percentage of cells nor DNA fragmentation was observed in treated
cells. Pd3 induced an increase in propidium iodide positive, annexin negative cellular population after 48-h treatment, suggestive of
necrosis. Detected increased activity of lactate dehydrogenase in culture medium of treated cells showed disruption of cell
membrane integrity upon treatment. Pd3 induced an increase in the number of acidic vesicles in the treated cells after 48 h.
Conclusion: Pd3 complex induces cytotoxic effects on neuroblastoma cell line in a time- anddose-dependent manner. The
mechanism by which exert its effect is probably necrosis withautophagy activation. The role of autophagy in Pd3-induced
cytotoxicity is not clear.
Keywords: polyoxometalates; POMs; cytotoxicity; autophagy; necrosis

Kopaonik, 2018.
193