Page 212 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
ИСПИТИВАЊЕ МЕХАНИЗМА ЦИТОТОКСИЧНОГ ЕФЕКТА КУРКУМИНА НА МОДЕЛУ КУЛТУРЕ КЕРАТИНОЦИТА IN VITRO

Аутор: Нађа Вукашиновић, Милош Грујић
e-mail: nadjavukasinovic@gmail.com
Ментор: проф. др Александра Исаковић
Институт за медицинску и клиничку биохемију, Медицински факултет Универзитета у Београду

Увод: Куркумин је кристална супстанца екстрахована из ризомабиље CurcumaLonga која се користи у исхрани и
традиционалној медицини Кине и Индије. Показује антиоксидативна и антиинфламаторна својства, а у зависности од
примењене концентрације куркумина, може имати цитотоксични или цитопротективни ефекат.
Циљ рада: Испитивање ефеката и механизама дејства куркумина на HаCаТ ћелијску линију хуманих кератиноцита.
Материјал и методе: Испитивање вијабилитета HаCаТ ћелијске линије и HаCаТ ћелија третираних натријум нитропрусидом
(СНП) вршено је применом метода Кристал виолет и МТТ. Применом проточне цитофлуориметрије квантификоване су
производња супероксидног анјона, активација каспаза и присуство киселих везикула уз примену одговарајућих
флуоресцентних проба (дихидроетидијум, апостат и акридин оранж).
Резултати: Куркумин примењен у концентрацијама већим од 3,125µМ након 24сата инкубације доводи до статистички
значајног дозно зависног смањења вијабилитета HаCаТ ћелија, при чему IC50 вредност износи 10,3 µМ. У концентрацији
IC50, куркумин доводи до повећања продукције супероксидног анјона (1,19 пута у односу на контролу), повећане
активације каспаза (1,35 пута у односу на контролу) и повећаног садржаја киселих везикула (1,15 пута у односу на контролу)
у HаCаТ ћелијама. У концентрацији 6,25 µМ куркумин примењен као претретман на HаCаТ ћелије које су 24сата инкубиране
са СНП-ом концентрације 2 µМ, потенцирао је цитотоксично дејство СНП-а.
Закључак: Куркумин испољава цитотoксичан ефекат према HаCаТ ћелијској линији хуманих кератиноцита
потенцијалноиндукујући апоптозу и аутофагију у чијој се основи највероватније налази повећана продукција супероксидног
анјона.
Кључне речи: куркумин; кератиноцити; апоптоза; аутофагија; оксидативни стрес

INVESTIGATION OF MECHANISM OF CYTOTOXIC EFFECT OF CURCUMIN IN HUMANE KERATYNOCYTES CELL CULTURE IN VITRO

Author: Nađa Vukašinović, Miloš Grujić
e-mail: nadjavukasinovic@gmail.com
Mentor: Full Prof. Aleksandra Isaković
Institute of Medical and Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine University of Belgrade

Introduction: Curcumin is a crystal substance derived from the plant Curcuma longa which is used as a dietary spice and as a
treatment in traditional medicine. It possesses anti-inflammatory and anti-oxidant activity. Depending on the used concentration of
curcumin, it can exhibit either cytotoxic or cytoprotective effect. Due to its properties and safety, it is studied as a potential
treatment in different inflammatory diseases.
The Aim: Determining the effect and molecular mechanismsof curcumin in HaCaT human keratinocyte culture.
Material and Methods: The viability rate of HaCaT cells and HaCaT cells treated with sodium nitroprusside (SNP) was determined
using Crystal violet and MTT assay. Flow cytometry was used for assessing the production of superoxide, caspase activityand the
presence of acidic vesicles in the cytoplasm, using specific fluorochromes (DHE, Apostat, Acridine orange).
Results: Curcumin applied in concentrations higher than 3.125µM after 24h incubation caused significant dose dependent
decrease in the viability of HaCaT cells with IC50 value being 10.3µM. In doses equal to IC50 value, curcumin leads to the increase
of superoxide production (1.19 times compared to the control group), increased caspase activity (1.35 times compared to the
control group) and increased presence of acidic cytoplasmic vesicles (1.15 times compared to the control group) in HaCaT cells. In
HaCaT cells treated with 2µM SNP curcumin applied in concentration of 6.25 µM causes sinergistic cytotoxic activity with the effect
of SNP.
Conclusion: Curcumin most likely induces apoptosis and autophagy in HaCaT human keratinocyte culture by increasing the
production of superoxide and caspase activity.
Keywords: curcumin; keratinocyte; apoptosis; autophagy; oxidative stress

Kopaonik, 2018.
206