Page 185 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ 26-30.
СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ Април

УТИЦАЈ АГМАТИНА НА ЕКСПРЕСИЈУ BDNF У МОЗГУ iNOS-/- KNOCKOUT МИШЕВА СА ЕКСПЕРИМЕНТАЛНИМ АУТОИМУНИМ
ЕНЦЕФАЛОМИЈЕЛИТИСОМ

Аутор: Ђорђе Маринковић, Тијана Петровић, Тамара Здравковић
e-mail: space996@gmail.com
Ментор: проф. др Ивана Стојановић
Катедра за биохемију, Медицински фaкултет Универзитетa у Нишу

Увод: Експериментални аутоимуни енцефаломијелитис (ЕАЕ), експериментални пандан мултипле склерозе (МС), је
инфламаторна и демијелинизирајућа болест ЦНС са клиничко-патолошким и имунолошким сличностима МС.
Циљ рaдa: Циљ рада је испитивање утицаја егзогено апликованог агматина на експресију можданог фактора раста (BDNF) и
значај азот моноксида (NO) у механизмима деловања агматина у ЦНС wild type и iNOS-/- мишева са ЕАЕ у циљу бољег
разумевања улоге BDNF у опоравку неурона у раној неуроинфламацији и терапијских потенцијала агматина.
Мaтеријaл и методе: Супкутаном ињекцијом мијелин базичног протеина (50 g по животињи) изазиван је ЕАЕ код CBA/H
wild-type (WT) и knockout iNOS-/- (KO) мишева, подељених у 5 група: контролна група - третирана 0,9% раствором NaCl (и.п.),
EAE група, CFA – третирана Complete Freund Adjuvant-oм - CFA, EAE+AГM - третирана агматином (75 mg/kg ТМ и.п.) након
изазивања ЕАЕ, и AГM група која је примала само агматин. Животиње су третиране свакодневно све време трајања
експеримента уз свакодневно праћење клиничких симптома ЕАЕ код сваке животиње. Жртвоване су 24-ог дана. У
хомогенатима целокупне масе великог мозга (ЦМВМ) и малог мозга одређивана је концентрација BDNF ELISA методом, а у
исечцима великог мозга одређивана је експресија BDNF имунохистохемијски.
Резултaти: Клинички симптоми ЕАЕ су значајно више изражени код WT у односу на KO мишеве, што указује на значај NO у
патогенези ЕАЕ. Агматин је испољио снажни протективни ефекат у односу на клиничке симптоме ЕАЕ код оба типа мишева.
Такође, код оба типа мишева са ЕАЕ долази до значајног пада концентрације BDNF (p<0,05). Код WT EAE мишева, али не и
КО ЕАЕ мишева, агматин доводи до значајног повећања концентрације BDNF у церебелуму и експресије BDNF у исечцима
великог мозга.
Зaкључaк: Добијени резултати потврђују да агматинергички систем може бити од користи у разумевању патогенетских
механизама оштећења ЦНС, као и циљ нових фармаколошких стратегија у третману поремећаја ЦНС, укључујући и
неуроинфламацију.
Кључне речи: експериментални аутоимуни енцефаломијелитис; BDNF; азот моноксид; iNOS-/- knockout мишеви; агматин

EFFECTS OF AGMATINE ON BDNF EXPRESSION IN iNOS-/- KNOCKOUT MICE WITH EXPERIMENTAL AUTOIMMUNE
ENCEPHALOMYELITIS

Author: Djordje Marinkovic, Tijana Petrovic, Tamara Zdravkovic
e-mail: space996@gmail.com
Mentor: Full Prof. Ivana Stojanovic
Department of Biochemistry, Faculty of Medicine University of Nis

Introduction: Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), experimental model of multiple sclerosis (MS), is inflammatory
and demyelinating CNS disease with clinically-pathological and immunological similarities with MS.
The Aim: The study aim was the investigation of exogenous agmatine influence on brain-derived neurotrophic factor (BDNF)
expression and nitric oxide (NO) importance in CNS of wild type and iNOS-/- mice with ЕАЕ, in the aim of better understanding the
role of BDNF in neuronal recovery in early neuroinflammation and the therapeutic potentials of agmatine.
Material and Methods: EAE was induced by subcutaneous injection of myelin basic protein (50 g per animal) to CBA/H wild-type
(WT) and knockout iNOS-/- (KO) mice divided into five groups: control group - treated by 0.9% NaCl (i.p.), EAE group, CFA group –
treated by Complete Freund Adjuvant - CFA (0.1 ml subcutaneously), EAE+AGM group - treated by agmatine (75 mg/kg bw i.p.)
upon EAE induction and AGM group - received only agmatine. The animals were treated every day during experiment and clinically
scored every day and sacrificed on day 24. In whole encephalitic mass (WEM) and cerebellum homogenates BDNF concentrations
were determined by ELISA method and brain BDNF expression was determined immunohystochemically.
Results: EAE clinical symptoms were significantly more expressed in WT than KO mice, pointing out the importance of NO in EAE
pathogenesis. Applied agmatine exerted strong protective effect on EAE clinical symptoms in both mice types. Also, in both EAE
mice types the significant decrease in BDNF concentration was noticed (p<0.05). In WT EAE mice, but not in KO EAE ones, agmatine
significantly increased BDNF concentration in cerebellum and WEM BDNF expression.
Conclusion: The obtained results confirm that agmatinergic system may be useful in understanding the pathogenetic mechanisms
of CNS damage, and could be the target for new pharmacological strategies in the treatment of different CNS disorders, including
neuroinflammation.
Keywords: experimental autoimmune encephalomyelitis; BDNF; nitric oxide; iNOS-/- knockout mice; agmatine

Kopaonik, 2018.
179