Page 182 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
УТИЦАЈ ИНХИБИТОРА ПРОТОНСКЕ ПУМПЕ НА ЕКСПРЕСИЈУ ГЕНА ЗА ПРОИНФЛАМАТОРНЕ ЦИТОКИНЕ И МОДУЛАЦИЈУ
ЋЕЛИЈСКЕ СМРТИ У ЕКСПЕРИМЕНТАЛНОМ АУТОИМУНСКОМ ЕНЦЕФАЛОМИЈЕЛИТИСУ

Аутор: Андона Миловановић, Нина Томоњић
e-mail: andona8@gmail.com
Ментор: доц. др Жељка Станојевић
Институт за медицинску и клиничку биохемију, Медицински факултет Универзитета у Београду

Увод: Експериментални аутоимунски енцефаломијелитис (ЕАЕ) је анимални модел мултипле склерозе (МС), имунски
посредоване демијелинизирајуће болести централног нервног система. Инхибитор протонске пумпе, пантопразол, се
користи за диспепсију, последицу глукокортикоидне терапије МС-а. Пантопразол мења гастрични пХ и тиме потенцијално
микробиоту, што делује на инфламацију и аутоимунски одговор. Такође, може да утиче и на процес ћелијске смрти,
апоптозу.
Циљ рада: Циљ овог рада је да се покаже дејство пантопразола на клиничко испољавање ЕАЕ-а, имуномодулаторне
механизме и модулацију процеса ћелијске смрти.
Материјал и методе: Женке пацова Dark Agouti соја су имунизоване хомогенатом кичмене мождине са комплетним
Фројндовим адјувансом. Две групе имунизованих животиња су добијале третман пантопразолом интраперитонеално од
дана имунизације до 7. односно 21. дана после имунизације у циљу испитивања ефеката пантопразола на клиничко
испољавање ЕАЕ-а и испитивања механизама његовог дејства. RT-PCR метода је коришћена за анализу релативне
експресије гена за проинфламаторне и антиинфламаторне цитокина и транскрипционе факторе. Имуноблот методом
анализирали смо дејство пантопразола на процес ћелијске смрти, апоптозу.
Резултати: Анализирањем клиничке слике уочено је погоршање клиничког испољавања ЕАЕ-а у групи пацова третираних
пантопразолом. Резултати RT-PCR методе показују да пантопразол доводи до повећане релативне експресије гена за
проинфламаторне цитокине IFNγ и IL-17. Имуноблот методом уочава се смањење нивоа маркера апоптозе, Casp3 и PARP-a у
групи животиња третираних пантопразолом што указује на инхибицију овог процеса.
Закључак: Пантопразол доводи до погоршања клиничког испољавања ЕАЕ-а што је највероватније последица инхибиције
процеса апоптозе, и повећане релативне ескпресије гена за проинфламаторне цитокине IFNγ и IL-17 у индуктивној фази
болести. Такође, можемо закључити да процес апоптозе има значајну улогу у имуномодулацији и неуроинфламацији.
Кључне речи: ЕАЕ; пантопразол; имуномодулација; апоптоза

INVESTIGATION OF PROTON PUMP INHIBITORS EFFECTS ON GENE EXPRESSION FOR PROINFLAMMATORY CYTOKINES AND
MODULATION OF CELL DEATH IN EXPERIMENTAL AUTOIMMUNE ENCEPHALOMYELITIS

Author: Andona Milovanović, Nina Tomonjić
e-mail: andona8@gmail.com
Mentor: Assist. Prof. ŽeljkaStanojević
Institute of Medical and Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine University of Belgrade

Introduction:Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is animal model of Multiple sclerosis (MS), immune mediated
demyelinating disease of central nervous system. Proton pump inhibitor, Pantoprazole is used for dyspepsia, which is a
consequence of glucocorticoid therapy of MS. Pantoprazole changes gastric pH and possibly microbiota, which can modulate
inflammation and autoimmune response. Also, it can affect process of cell death, apoptosis.
The Aim: The aim of this study was to investigate Pantoprazole’s effects on EAE clinical manifestation, immunomodulatory
mechanisms and modulation of cell death.
Material and Methods: Dark Agouti female rats were immunized using spinal cord homogenate and Complete Freund’s adjuvant.
th
st
Two groups of immunized rats were treated with Pantoprazole intraperitonealy from the day of immunization until 7 or 21 day
after immunization, respectively, in order to investigate the effect of Pantoprazole on EAE’s clinical manifestation and to investigate
mechanisms of its action. RT-PCR was used to analyze relative gene expression of proinflammatory and anti-inflammatory cytokines
and transcription factors. Immunoblot was used to asses Pantoprazole’s effect on apoptosis.
Results: Clinical score analysis revealed that Pantoprazole significantly deteriorates clinical sings of EAE. RT-PCR analysis showed
that Pantoprazole increased relative gene expression of proinflammatory cytokines IFNγ and IL-17. Immunoblot analysis revealed
that Pantoprazole leads to decrease level of Casp3 and PARP, marker of apoptosis, which indicates the inhibition of apoptosis.
Conclusion: Pantoprazole deteriorates clinical signs of EAE, which is consequence of decreased process of cell death, apoptosis, of
autoreactive cells during inductive phase of the disease. Also, results of RT-PCR shows us increased relative gene expression of
proinflamatory cytokines IFNγ and IL-17. So we can conclude that cell death modulatiom can play a role in neuroinflammation and
autoimmune diseases.
Keywords: EAE; Pantoprazole; immunomodulation; apoptosis

Kopaonik, 2018.
176