Page 1014 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
РАЗВОЈ ЕКОЛОШКИ ПРИХВАТЉИВЕ ХРОМАТОГРАФСКЕ МЕТОДЕ ЗА РАЗДВАЈАЊЕ ДРОНЕДАРОН-ХИДРОХЛОРИДА И
ЊЕГОВИХ ДЕГРАДАЦИОНИХ ПРОИЗВОДА

Аутори: Тијана Миловић, Тијана Павловић
e-mail: tijanapavlovic26@gmail.com
Ментори: доц. др Ана Протић, маг. фарм. Невена Маљурић
Катедра за аналитику лекова, Фармацеутски факултет Универзитетa у Београду

Увод: Методе реверзно-фазне течне хроматографије под високим притиском (RP-HPLC) потенцирају употребу
ацетонитрила, због његовог повољног утицаја на хроматографску ефикасност. Ацетонитрил се сматра токсичним и
запаљивим органским растварачем, па се тежи превођењу RP-HPLC у зелене, применом различитих приступа и стратегија.
Течна хроматографија под јако високим притиском (UHPLC) је предложена као једно од могућих решења, због краћег
времена трајања хроматографске анализе и мањег утрошка органског растварача.
Циљ рада: Циљ рада је развој и оптимизација градијентне UHPLC методе за сепарацију дронедарон-хидрохлорида и
његових деградационих производа, и упоређивање еколошког аналитичког скорa ове методе са већ развијеном методом
мицеларне течне хроматографијe (MLC), која такође спада у једну од техника које прате концепт зелене хемије.
Материјал и методе: Експерименти су изведени на UPLC систему ThermoScientificAccela на Poroshell 120 EC-C18 (2,1x50 mm,
1,9 µm) колони. Детекција је ивршена Photodiode Array (PDA) детектором на таласној дужини од 290 nm. Примењено је
градијентно елуирање. Метода је оптимизована помоћу Design Expert 7.0.0. софтвера. Као одговор праћена је разлика
између краја једног и почетка другог пика критичног пара (S).
Резултати: Aнализом 3D графикона површине одговора одређени су оптимални услови за раздвајање дронедарон-
хидрохлорида и његових нечистоћа. Оптимални хроматографски услови обухватају: почетни удео ацетонитрила 6%, крајњи
удео ацетонитрила 50%, време трајање градијента од 5 минута и 10 mM амонијум-ацетата (pH=7). Израчунат је еколошки
аналитички скор за градијентну UHPLC методу,и за MLC, који су редом износили 83 и 90 поена, од укупних 100.
Закључак: На основу израчунатог еколошког аналитичког скора, закључујемо да обе методе следе принципе зелене хемије.
UHPLC је прихватљивија у погледу утрошка реагенаса, штетности коришћених хемикалија, тако и количине отпада.
Кључне речи: дронедарон-хидрохлорид; еколошки аналитички скор; UHPLC, MLC, експериментални дизајн

ТHE DEVELOPMENT OF ECOLOGICCALY ACCEPTABLE UHPLC METHOD FOR SEPARATION OF DRONEDARONE-HYDROCHLORIDE
AND ITS DEGRADATION PRODUCTS

Authors: Tijana Milović, Tijana Pavlović
e-mail: tijanapavlovic26@gmail.com
Mentors: Assist. Prof. Ana Protić, TA Nevena Maljurić
Department of Drug Analysis, Faculty of Pharmacy University of Belgrade

Introduction: The use of acetonitrile in Reversed-Phase High Pressure Liquid Chromatography methods (RP-HPLC) has been
preferred due to its positive influence on chromatographic efficiency. Acetonitrile is considered toxic and flammable, so methods
that use acetonitrile should be greened, applying different „greening“ strategies. Ultra High Pressure Liquid Chromatography
(UHPLC) method has a possibility to be ecologically acceptable method, because of shorter chromatographic run time and low
amount of organic solvents used.
The Aim: The aim is to develop and optimize gradient UHPLC method for separation of dronedarone-hydrochloride and its
degradation products and calculates eco-scale score, which would be used to compare the ecological acceptance of developed
UHPLC method with previously developed micellar chromatography method (MLC), which is also one of the techniques following
green chemistry principles.
Маterial and Methods: Experiments were carried out on UPLC Thermo Scientific Accela on Poroshell 120 EC-C18 (2,1x50 mm, 1,9
µm) column. Detector was Photodiode Array (PDA) detector, wavelength was 290 nm. Gradient elution program was applied. The
method was optimized using Design Expert 7.0.0. The difference between the end of the first, and the start of the second peak of a
critical pair (S) was used as system’s response.
Results: Optimal separation conditions were determined by analysis of 3D response surface plot, and they are as follows: the initial
proportion of acetonitrile 6%, the final proportion of acetonitrile 50%, the gradient duration of 5 minutes and concentration of
ammonium acetate buffer (pH=7) 10 mM. Eco-scale scores for UHPLC and MLC methods were 83 and 90 points, respectively, out of
total 100.
Conclusion: Based on calculated eco-scale scores, both methods follow principles of green chemistry and can be classified as green
chromatography methods. UHPLC method is more expectable than MLC, in terms of reagent’s consumption, chemical’s toxicity and
the amount of waste.
Keywords: dronedarone; analytical Eco-scale score; UHPLC; MLC; experimental design

Kopaonik, 2018.
1008