Page 257 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ 26-30.
СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ Април

УТИЦАЈ СОЈНИХ РАЗЛИКА НА МОДУЛАЦИЈУ ЕКСПЕРИМЕНТАЛНОГ КОЛИТИСА МЕЗЕНХИМАЛНИМ МАТИЧНИМ ЋЕЛИЈАМА

Аутор: Милица Обрадовић, Анђела Ђурић
e-mail: milicaobradovic35@yahoo.com
Ментор: проф. др Владислав Воларевић
Центар за молекулску медицину и истраживање матичних ћелија, Факултет медицинских наука Универзитет у Крагујевцу

Увод: Мезенхималне матичне ћелије (енгл. Mesenchymal Stem Cells, MSCs), се због својих имуномодулаторних
карактеристика, испитују у клиничким студијама улцерозног колитиса. Резултати указују да системска примена MSCs, још
увек непознатим механизмом, узрокује побољшање или погоршање клиничког тока ове болести.
Циљ рада: Да би смо испитали утицај поларизације имунског одговора на ефекат терапијске примене MSCs у лечењу
колитиса, индуковали смо колитис у C57BL/6 мишева (Th1- доминантан сој) и BALBc мишева (Th2- доминантан сој),
применом декстран натријум сулфата (енгл. dextran sulphate sodium, DSS).
Материјал и методе: Колитис је изазван петодневном применом 3% воденог раствора DSS-а са периодом опоравка (5 дана)
6
токог ког су животиње имале приступ само пијаћој води (per os). MSCs су апликоване интраперитонеално, (1х10
ћелија/200µl NaCl) 2. и 5. дана од почетка индукције болести. Анализиран је клинички ток болести, патохистолошке
промене и одређиван фенотип инфламацијских ћелија у колону.
Резултати: MSCs су значајно смањиле акутни колитис C57BL/6 мишева. Укупан број колон-инфилтришућих дендритских
ћелија које продукују инфламацијске цитокине (IL-12, TNF-α и IL-1β) је био значајно мањи у групи C57BL/6 мишева које су
примиле MSCs. Није постојала значајна разлика у броју класично активираних М1 макрофага и алтернативно активираних
М2 макрофага.
Међутим, примена MSCs је значајно погоршала колитис BALBc мишева. Клинички скор, губитак телесне масе, као и
скраћење дебелог црева је било знатно веће након примене MSCs. Број колон-инфилтришућих дендритских ћелија које
експримирају костимулаторни молекул (CD40) и продукују проинфламацијске цитокине (IL-12, TNF-α и IL-1β) је био значајно
већи у DSS-третираним BALBc животињама које су примиле MSCs. Није постојала разлика у броју М1 и М2 макрофага,
неутрофила и еозинофила између експерименталних група.
Закључак: MSCs повећавају присуство инфламацијских дендритских ћелија у дебелом цреву BALBc мишева, а смањују
њихов број у колону C57BL/6 животиња и тиме утичу на развој и прогресију акутног колитиса.
Кључне речи: DSS; колитис; MSCs, дендритске ћелије; C57BL/6 мишеви; BALBc мишеви

THE IMPACT OF STRAIN DIFFERENCES ON MESENCHYMAL STEM CELL-BASED MODULATION OF EXPERIMENTAL COLITIS

Author: Milica Obradovic, Andjela Djuric
e-mail: milicaobradovic35@yahoo.com
Mentor: Assoc. Prof. Vladislav Volarevic
Center for Molecular Medicine and Stem Cell Research, Faculty of Medical Sciences University of Kragujevac

Introduction: Several preclinical studies suggest that, due to their immunomodulatory characteristics, mesenchymal stem cells
(MSCs) could be promising therapeutic agents in the therapy of ulcerative colitis (UC).
The Aim: Since some of UC patients have dominant Th2 immune response (atopic constitution), the main aim of this study was to
evaluate effects of MSCs in DSS-treated BALBc mice (Th2-dominant strain) and to compare these findings with results obtained in
C57BL6 mice (Th1-dominant strain).
Material and Methods: DSS (3%, molecular weight 40kDa) was given to C57BL6 and BALBc mice for 5 days, followed by 5 days of
6
recovery period. Mouse bone marrow-derived MSCs (1×10 ) were given via intraperitoneal injections on days 2 and 5. Disease
Activity Index (weight loss, stool consistency, visible blood in feces) and histological analysis were used for evaluation of colitis. The
phenotype of colon-infiltrated immune cells was determined by flow cytometry.
Results: MSCs significantly attenuated colitis in DSS-treated C57BL/6 mice. The clinical and histological scores, body weight loss,
and colon shortening were significantly lower in DSS-treated C57BL/6 animals that received MSCs. On contrary, application of MSCs
significantly aggravated colitis in BALBc mice. Serum levels of inflammatory cytokines (IL-12, TNF-α and IL-1β) were increased in
DSS+MSC-treated BALBc animals compared to DSS-only treated BALBc mice. This was accompanied by significantly enhanced
infiltration of CD45+CD11c+ inflammatory DCs in colons of DSS+MSC-treated BALBc mice. These DCs had increased expression of
costimulatory (CD40) and had higher production of pro-inflammatory cytokines (IL-12, TNF-α and IL-1β) when compared to colon-
infiltrating DCs from DSS-only treated BALBc animals. Application of MSCs did not alter colon infiltration of neutrophils and
eosinophils in DSS-treated BALB mice, suggesting that antigen-presenting cells were the main cellular targets of MSCs.
Conclusion: MSCs promote expansion of inflammatory DCs in colons of BALBc mice resulting with aggravation of DSS-induced
colitis.
Keywords: DSS colitis; MSCs; C57BL/6 mice; BALBc mice; ulcerative colitis

Kopaonik, 2018.
251