Page 246 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
ПРИМЕНА МЕТОДЕ MULTIPLEX NESTED PCR У ДЕТЕКЦИЈИ КОЊСКИХ ХЕРПЕСВИРУСА 1 И 4

Аутор: Сара Китановић
e-mail: sarakitanovic.saki@gmail.com
Ментор: Андреа Радаљ, асистент
Катедра за микробиологију, Факултет ветеринарске медицине Универзитета у Београду

Увод: Инфекције коњским херпесвирусима имају велики економски значај у коњарству широм света с обзиром да доводе
до смањене радне способности оболелих животиња, а значајно ометају слободно кретање и транспорт животиња ради
такмичења и парења. Коњски херпесвирус 1 (EHV–1) доводи до појаве абортуса, респираторног обољења и
енцефаломијелитиса, док се код коња инфицираних коњским херпесвирусом 4 (ЕHV–4) углавном јављају само
респираторни симптоми. Херпесвируси коња успостављају латентну инфекцију у сензорним ганглионима, док до
реактивације вируса са последичним излучивањем у спољашњу средину најчешће долази услед дејства стреса. Метода
multiplex nested PCR представља осетљив и високоспецифичан тест за симултану идентификацију већег броја различитих
коњских херпесвируса у испитиваним узорцима, коришћењем више парова специфичних прајмера, при чему додатно
убрзава дијагностику поменутих инфекција.
Циљ рада: Циљ истраживања је било испитивање могућности примене методе multiplex nested PCR у брзој и поузданој
идентификацији коњских херпесвируса 1 и 4 у узорцима носних брисева пореклом од невакцинисаних радних коња.
Материјал и методе: Испитано је укупно 9 носних брисева клинички здравих, невакцинисаних радних коња са Златибора.
За извођење методе multiplex nested PCR коришћени су парови олигонуклеотидних прајмера који амплификују делове гена
који кодирају синтезу гликопротеина Б EHV–1 и EHV–4.
Резултати: Потврђено је присуство EHV–1 у свих 9 узорака носних брисева коња (100%), док је нуклеинска киселина EHV–4
детектована у једном узорку (11,11%) симултано са EHV-1 као мешана инфекција.
Закључак: Доказано је присуство асимптоматске инфекције коња на територији Републике Србије коњским херпесвирусима
1 и 4. Метода multiplex nested PCR може успешно користити у рутинској дијагностици херпесвирусних инфекција коња без
видљивих клиничких симптома обољења као брза, прецизна и поуздана метода, а што је нарочито значајно приликом
спровођења епизоотиолошких студија.
Кључне речи: EHV–1; EHV–4; multiplex nested PCR

APPLICATION OF MULTIPLEX NESTED PCR IN THE DETECTION OF EQUINE HERPESVIRUSЕS 1 AND 4

Author: Sara Kitanović
e-mail: sarakitanovic.saki@gmail.com
Mentor: TA Andrea Radalj
Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine University of Belgrade

Introduction: Equine herpesviral infections have a major economic and welfare impact on all sectors of the horse industry
worldwide, both through their direct clinical effects on the horse and the interference with horse movement for breeding and
competition. Infections caused by equine herpesvirus 1 (EHV-1) are characterized by the occurrence of abortion, respiratory
disease and encephalomyelitis, whilst mainly respiratory symptoms are detected in horses infected with equine herpesvirus 4 (EHV-
4). Equine herpesviruses establish a latent infection in the sensory ganglions, whilst virus reactivation and shedding is linked to the
influence of stress. Multiplex nested PCR is a sensitive and precise test for simultaneous identification of a variety of different
equine herpes viruses in the examined samples, using multiple pairs of specific primers, thus further accelerating the diagnosis of
EHV infections.
The Aim: The aim of the study was to investigate the possibility of the application of multiplex nested PCR in rapid and reliable
identification of EHV-1 and EHV-4 in nasal swabs originating from non-vaccinated working horses.
Material and Methods: A total of 9 nasal swabs of clinically healthy, non-vaccinated working horses from Zlatibor were examined.
Primer pairs amplifying the parts of the genes encoding the synthesis of glycoprotein B of EHV-1 and EHV-4 were used.
Results: The presence of EHV-1 was confirmed in all 9 samples of nasal swabs (100%), whilst EHV-4 was detected simultaneously
with EHV-1 in one sample (11.11%) as a mixed infection.
Conclusion: The presence of asymptomatic carrier horses has been detected in the Republic of Serbia. Multiplex nested PCR can be
used in the routine diagnostics of herpesviral infections of horses without visible clinical symptoms as a rapid, precise and reliable
method, which is useful in epizootiological studies.
Keywords: EHV – 1; EHV – 4; multiplex nested PCR

Kopaonik, 2018.
240