Page 328 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
МЕТИЛАЦИЈА ГЕНСКИХ ПРОМОТОРА У ХРОНИЧНИМ ПЕРИАПИКАЛНИМ ЛЕЗИЈАМА ИНФИЦИРАНИМ EPSTEIN-BARR
ВИРУСОМ

Аутор: Огњан Павловић, Лука Товаровић
e-mail: ognjan1993@gmail.com
Ментор: Доц. др Маја Милетић, Асист. др Александар Јаковљевић
ОЈ „Институтски предмети“ - Патофизиологија, Стоматолошки факултет Универзитета у Београду

Увод: Периапикалне лезије представљају хроничне запаљенске промене које настају на врху корена зуба са авиталном
пулпом. У основи њиховог настанка леже многобројни етиолошки чиниоци, али су најчешће узроковане дејством
различитих микроорганизама пореклом из некротичне пулпе. Савремена истраживања указују на потенцијалну улогу
вируса из породице Herpesviridae у етиопатогенези ових патолошких стања.
Циљ рада: Испитати метилациони статус имунорегулаторних гена (FOXP3CPG, FOXP3ENH и IFN-γ) у хроничним
периапикалним лезијама и потенцијални утицај Epstein-Barr вируса (EBV) на разлике у метилационом статусу испитиваних
гена.
Материјал и методе: У истраживању је коришћено 20 узорака хроничних периапикалних лезија добијених након хируршке
ресекције врха корена зуба. Контролну групу је чинило 10 узорака здравих зубних пулпи умњака, екстрахованих из
ортодонтских разлога. Ткива обе групе су најпре машински хомогенизована, након чега је изолована DNK употребом
комерцијалног изолационог сета. Употребом уметнуте методе ланчане реакције полимеразе (nested PCR) доказивано је
присуство EBV-а, на основу чега су све лезије подељене на EBV позитивне и EBV негативне. Метилациони статус FOXP3CPG,
FOXP3ENH и IFN-γ гена је испитиван методом метил специфичног PCR-а, а затим је провера добијених PCR продуката
2
извршена електрофорезом. χ тест је употребљен за доказивање статистички значајне разлике, при чему су вредности
испод p<0.05 сматране статистички значајним.
Резултати: Утврђен је значајно већи степен метилације сва три испитивана гена у експерименталној у односу на контролну
групу (p=0.02, p=0.002 и p<0.001). Додатно, уочена је разлика на граници статистичке значајности између EBV позитивних у
односу на EBV негативне лезије у случају IFN-γ гена (p=0,052), док између два преостала гена није постојала статистички
значајна разлика између испитиваних група.
Закључак: Измењен метилациони статус генских промотора (FOXP3CPG, FOXP3ENH и IFN-γ) је значајно учесталији у
хроничним периапикалним лезијама у поређењу са контролном групом. Потребна су додатна испитивања како би се
утврдила улога EBV-а у етиопатогенези периапикалних лезија.
Кључне речи: хроничне периапикалне лезије; метилација; EBV; имунорегулаторни гени

METHYLATION OF GENE PROMOTERS IN CHRONIC APICAL PERIODONTITIS INFECTED BY EPSTEIN-BARR VIRUS

Author: Ognjan Pavlović, Luka Tovarović
e-mail: ognjan1993@gmail.com
Mentor: Assist. Prof. Maja Miletić, Teaching assist. Aleksandar Jakovljević
Department of Pathophysiology, School of Dental Medicine University of Belgrade

Introduction: Apical periodontitis represent a chronic inflammatory process within periapical tissues of the teeth devoid of vital
pulp. Although various factors are able to induce periapical inflammation, the polymicrobial infection of endodontic origin is
essential for its establishment. Previous studies indicate the potential role of viruses from Herpesviridae family in the
etiopathogenesis of these pathological conditions.
The Aim: To investigate the differences in methylation status of immunoregulatory genes (FOXP3CPG, FOXP3ENH and IFN-γ) in
apical periodontitis samples and the influence of Epstein-Barr virus (EBV) in that process.
Material and Methods: Twenty samples of apical periodontitis, collected after apicoectomy procedure, and 10 samples of healthy
dental pulps were enrolled in the study. All samples were homogenized and DNA was extracted using a commercial kit. The nested
PCR method was used to determine the presence of EBV. Based on the presence of EBV all apical periodontitis samples were
divided into two subgroups: EBV positive and EBV negative. Methyl specific PCR method was used for examination of methylation
2
status of immunoregulatory genes. Specific EBV amplicons of expected size were detected by electrophoresis. The χ test was
conducted to assess statistical significance between categorical data and all P values less than .05 were considered significant.
Results: The increased alteration of methylation status was significant for all investigated genes in the apical periodontitis samples
compared to the controls (p=0.02, p=0.002, p<0.001). The difference in the methylation status of IFN-γ gene between EBV positive
and EBV negative lesions was on a border of a significance (p=0.052), without statistically significant differences for other
investigated genes.
Conclusion: Altered methylation status of gene promoters is significantly more common in apical periodontitis lesions compared to
the control groups. Further studies should provide more data on EBV in the etiopathogenesis of apical periodontitis.
Keywords: chronic periapical lesions; methylation; EBV; immunoregulatory genes

Kopaonik, 2018.
322