Page 19 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ 26-30.
СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ Април

ИСПИТИВАЊЕ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ ХЕМИОТЕРАПЕУТИКА НА ЋЕЛИЈЕ
ПРИМАРНИХ КУЛТУРА ОРАЛНОГ ПЛАНОЦЕЛУЛАРНОГ КАРЦИНОМА

Аутор: Теодора Андријевић
e-mail: teodoraandrijev@gmail.com
Ментор: проф. др Јелена Милашин, др Милош Лазаревић
Стоматолошки факултет, Универзитет у Београду

Увод: Орални планоцелуларни карцином (ОПК) је један од најчешћих карцинома у максилофацијалној регији. Без обзира на
значајaн напредак у терапијским модалитетима, његово лечење и даље представља проблем. Стога, проналажење
нових/побољшаних метода лечења је од круцијалне важности.
Циљ рада: Циљ ове студије је био да се процени временскo и дозно зависни ефекат два цитостатика на примарне културе
ОПК -један који је у стандардној употреби (Cisplatin) и један који то није (5-Fluorouracil).
Материјал и методе: Изоловане ћелије ОПК су засејане у Т75 боце и узгајане у комплетном медијуму који је садржао 10%
феталног говеђег серума и антибиотике. Медијум је мењан на свака 2 до 3 дана и рађена је пасажа ћелија до достизања
80% конфлуетности. Десет хиљада ћелија је засејано на плочу са 96 бунарића и инкубирано. После 24ч оне су третиране са
100µl (80, 50 и 20 µg/ml) 5-Fluorouracil-а и (10, 5 и 1 µg/ml) Cisplatin-е. После 24ч/72ч/7 дана, раствор МТТ је додат у сваки
бунарић. Инкубирање је трајало 4ч и потом је избачен супернатант. Преципитати су растворени у 100 µl ДМСО. Оптичка
густина је мерена на 540nm користећи ELISA читач. Експеримент је рађен у трипликату и поновљен два пута.
Резултати: Седмодневни третман 5-Fluorouracil-om и Cisplatin-om је значајно редуковао вијабилност ћелија, у односу на
третмане у трајању од 72 и 24ч. Цитостатици су показали сличан цитотоксичан ефекат. Након 7 дана, 50 µg/ml 5-Fluorouracil-
а и 5 µg/ml Cisplatin-е су дали најбоље резултате и довели до преживљавања ћелија од 0,53% и 1,31%.
Закључак: Резултати говоре у прилог томе да културе ОПК могу бити добар експериментални модел за тестирање
антитуморских препарата. Изабрани цитостатици су показали дозно и временско зависни ефекат на преживљавање ћелија
ОПК. Такође је показано да 5-Fluorouracil може бити разматран за примену у терапији OSCC.
Kључне речи: орални планоцелуларни карцином (ОПК); цисплатина; 5-флуороурацил; вијабилност

THE ANALYSIS OF CYTOTOXIC EFFECT OF CHEMOTHERAPEUTICS ON ORAL
SQUAMOUS CELL CARCINOMA PRIMARY CULTURES

Author: Teodora Andrijević
e-mail: teodoraandrijev@gmail.com
Mentor: Full Prof. Jelena Milašin, TA Miloš Lazarević
School of Dental Medicine, University of Belgrade

Introduction: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is one of the most common cancers in the maxillofacial region. It remains a
considerable medical challenge, despite considerable advances in the treatment that occurred during last decades. Thus, finding
new and or improved therapeutic modalities would be of substantial importance.
The Aim: to evaluate the time and dose dependent effects of two cytostatics on primary OSCC cultures- one conventionally used in
OSCC therapy (Cisplatin) and one not (5-Fluorouracil).
Material and Methods: Isolated cells from oral cancer were grown in DMEM supplemented with 10% FBS and antibiotic and
seeded into T75 cell culture flasks. The medium was changed every 2-3 days and the cells were passaged prior to reaching 80%
confluence. Ten thousand cells were seeded in a 96-well plate and incubated. After 24h they were treated with 100µl of 80, 50, 20
µg/ml 5-Fluorouracil and 10, 5 and 1 µg/ml Cisplatin. After 24h/72h/7 days, MTT was added to each well, incubated for 4 h, and the
supernatant was discarded. Precipitates were dissolved in 100 µl DMSO by shaking. Optical density was measured at 540 nm using
an ELISA reader. The assay was done in triplicate, repeated twice.
Results: The cell viability after the 7 day-treatment was significantly lower compared to 72 and 24h-treatments in both 5-
Fluorouracil and Cisplatin application. Overall, the effects of both chemotherapeutics were similar. After 7 days, 50 µg/ml 5-
Fluorouracil and 5 µg/ml Cisplatin gave the best results, i.e. cell viability was reduced to 0.53% and 1.31%, respectively.
Conclusion: These results suggest that OSCC cultures may be used as an experimental model for antineoplastic drugs testing. The
chemotherapeutics used in the present study showed dose and time- dependent effect on cancer cell viability. It was also shown
that 5-Fluorouracil might be considered in OSCC therapy as well.
Key words: oral squamous cell carcinoma (OSCC; cisplatin; 5-fluorouracil; viability

Kopaonik, 2018.
13