Page 114 - 59. КОНГРЕС СТУДЕНАТА БИОМЕДИЦИНСКИХ НАУКА СРБИЈЕ СА ИНТЕРНАЦИОНАЛНИМ УЧЕШЋЕМ

59th SERBIAN STUDENTS’ CONFERENCE OF BIOMEDICAL SCIENCES
April WITH INTERNATIONAL PARTICIPATION
26-30
ДЕТЕКЦИЈА ПРИСУСТВА ХРОМОГРАНИНА И СИНАПТОФИЗИНА У АУТОЛИЗОЗОМИМА У ТУМОРСКИМ ЋЕЛИЈАМА
БОЛЕСНИКА СА НЕУРОБЛАСТОМИМА

Аутор: Софија Јовановић, Адриана Јоксимовић, Катарина Ивановић
e-mail: sofijajovanovic@icloud.com
Ментор: проф. др Тамара Кравић-Стевовић,
Институт за хистологију и ембриологију „Александар Ђ. Костић“, Медицински факултет Универзитета у Београду

Увод: Периферни неуробластни тумори представљају групу тумора порекла примордијалних ћелија нервне кресте. У
ћелијама ових тумора запажено је присуство неуросекреторних гранула (NSG). Синаптофизин и хромогранин су
гликопротеини, панендокрини маркери. Кринофагија је физиолошки феномен присутан код бројних ткива, односно ћелија,
карактеристично неуроендокриног порекла, који подразумева аутофагију неуросекреторних везикула, из различитих
разлога.
Циљ рада: Циљ овог рада је да се покаже да ли се синаптофизин и хромогранин налазе у аутолизозомима ћелија
периферних неуробластних тумора и тиме докаже присуство кринофагије у овим туморима.
Материјал и методе: Узорци анализирани у овом истраживању добијени су биопсијом туморског ткива 11
новодијагностикованих педијатријских болесника. Узето је пет узорака тумора са добром прогнозом и шест узорака тумора
са лошом прогнозом. Замрзнути узорци тумора фиксирани су у глутаралдехиду, калупљени у Епокси смолама и сечени
помоћу ултрамикротома. Анализа аутолизозома са NSG вршена је на трансмисионом електронском микроскопу. Детекција
присуства хромогранина, синаптофизина и LC3, маркера аутофагије, рађена је на конфокалном микроскопу.
Резултати: Методама електронске микроскопије утврђено је да је број кринофагијских везикула у неуробластима тумора
неповољне прогнозе већи од њиховог броја у неуробластима тумора повољне прогнозе. Иако су конфокалним
микроскопом детектовани хромогранин и синаптофизин, није показана колокализација ових маркера са LC3.
Закључак: Одсуство колокализације хромогранина и синаптофизина са маркером макроаутофагије, LC3b, представља
потенцијални доказ да се молекуларни механизми кринофагије у ћелијама неуробластома разликују од истих код
макроаутофагије.
Кључне речи: периферни неуробластни тумори; неуросекреторне грануле; кринофагија; синаптофизин; хромогранин

CHROMOGRANIN AND SYNAPTOPHYSIN DETECTION IN AUTOLYSOSOMES OF TUMOR CELLS IN NEUROBLASTOMA PATIENTS

Author: Sofija Jovanović, Adriana Joksimović, Katarina Ivanović
e-mail: sofijajovanovic@icloud.com
Mentor: Assoc. Prof. Tamara Kravić-Stevović
The Institute for histology and embryology “Aleksandar Đ. Kos ć”, School of medicine, University of Belgrade

Introduction: Peripheral neuroblastic tumors are a group of tumors arising from primordial neural crest cells. Neurosecretory
granules (NSG) can be seen in the cytoplasm of the cells of these tumors. Chromogranin and synaptophysin are glycoproteins that
frequently serve as panendocrine markers. Crinophagy, as an ultraphysilogical phenomenon present in numerous tissues, is a
characteristic of all neuroendocrine cells, theirs included. It entails autophagy of NSGs, for various reasons.
The Aim: The aim of this study was to determine whether synaptophysin and chromogranin are present in the autolysosomes of
cells of peripheral neuroblastic tumors and, consequently, prove the existence of crinophagy in these cells.
Material and Methods: Tumor tissue biopsies came from 11 previously untreated pediatric patients diagnosed with peripheral
neuroblastic tumors. Five samples of tumors with a favorable and six samples of tumors with an unfavorable prognosis were taken
into consideration. The frozen tumor samples were fixed in glutaraldehyde, embedded in Epoxy resins and cut by an
ultramicrotome. The analysis of autolysosomes containing NSG was done using transmission electron microscopy, whereas the
detection of chromogranin, synaptophysin and LC3, an autophagy marker, were done using confocal microscopy.
Results: By way of transmission electron microscopy we’ve established there is a larger number of crinophagic vesicles in the
neuroblasts of tumors with an unfavorable prognosis than the corresponding number seen in cells of tumors with a favorable
prognosis. Chromogranin and synaptophysin were successfully detected in the cytoplasm of these tumor cells, however, they didn’t
appear to colocalize with the LC3 protein.
Conclusion: The observed absence of colocalisation of chromogranin and synaptophysin with LC3b, as a macroautophagy marker,
comprises potential evidence for the premise that the molecular mechanisms of autophagy in neuroblastoma cells differ from said
mechanisms in macroautophagy.
Keywords: peripheral neuroblastic tumors; neurosecretory granules; crinophagy; synaptophysin; chromogranin

Kopaonik, 2018.
108